tace 聯(lián)合cik 治療晚期肝癌患者療效評(píng)價(jià)
董 靜，陳照林，陳 曦，劉 波
【摘要】目的 探討采用經(jīng)肝動(dòng)脈栓塞化療術(shù)（tace）聯(lián)合應(yīng)用細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cik）治療晚期肝癌患者的臨床療效。方法 我科 2012 年 1 月～2013 年 12 月住院的原發(fā)性肝癌患者 60 例，被隨機(jī)分為兩組。30 例患者在tace 治療基礎(chǔ)上給予cik 治療，另 30 例患者僅接受tace 治療。取患者自體外周血或健康產(chǎn)婦分娩臍血行cik 培養(yǎng)。在 tace 治療 10～15 d 后給予 cik 細(xì)胞懸液（含 1.0×109 個(gè)細(xì)胞）外周靜脈輸注，連續(xù)或隔日輸注 1次，共 3 次。結(jié)果 在治療 6 m 時(shí)，聯(lián)合組血清甲胎蛋白水平為 （87.27±29.45） ng/ml，顯著低于 tace 組[（158.78±99.09） ng/ml，p＜0.05]；聯(lián)合組腫瘤大小為（4.37±1.78）cm，也顯著小于 tace 組[（5.48±1.61）cm，p＜ 0.05]；治療后 3 m、6 m 和 9 m 行影像學(xué)檢查，聯(lián)合組病灶無增多、增大，tace 組在治療 3 m 后有 4 例出現(xiàn)肝內(nèi)病灶增大；聯(lián)合組 2 a 生存率為 53.3%，顯著高于 tace 組的 33.3%（p＜0.05）。結(jié)論 tace 聯(lián)合 cik 治療晚期肝癌患者有一定的效果，患者耐受性良好，無嚴(yán)重不良反應(yīng)，能明顯提高患者生存率。
【關(guān)鍵詞】 原發(fā)性肝癌；肝動(dòng)脈栓塞化療；細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞；治療
doi：10.3969/j.issn.1672- 5069.2017.02.016
efficacy of tace com bined with cik cells for the treatm ent of patients with advanced prim ary liver cancer dong jing，chen zhaolin，chen xi，et al. department of infectious disease，105th hospital，hefei 230031， anhui province，china
corresponding author: liu bo，
【 abstract 】 o bjective to investigate the clinical efficacy of cytokine-induced killer cells （cik） combined with transcatheter arterial chemoembolization （tace） for the treatment of patients with primary liver cancer （plc）.
methods a total of 60 patients with plc were enrolled in our hospital between january 2012 and december 2013. the patients were divided into two groups，and 30 patients were treated with tace plus cik，and another
30 were treated with tace alone. the ciks was obtained from autonomous peripheral blood or from healthy
umbilical cord blood，and the cell suspensions were given 10 to 15 days after tace with 1.0 ×109 cells each， once a day or once two days for three times. results serum fetoprotein level was （87.27 ±29.45） ng/ml in combination group six months after treatment，significantly lower than （158.78±99.09） ng/ml in tace group （p＜ 0.05）；the tumor size was （4.37 ±1.78）cm in combination group，much smaller than [（5.48 ±1.61）cm，p ＜0.05] in tace group；the 2 a survival rate in combination group was 53.3% ，much higher than 33.3% in tace group
（p＜0.05）. conclusion ciks treatment after tace is an alternative approaches for patients with advanced liver cancer，which might prolong patients’survival.
【key words】 primary liver cancer；transcatheter arterial chemoembolization；cytokine -induced killer cells； therapy
對(duì)于中晚期患者，臨床醫(yī)生更加關(guān)注肝動(dòng)脈栓塞 化 療 （transcatheter arterial chemoembolization， tace） 和細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine- in-
作者單位：230031 合肥市jie放軍第 105 醫(yī)院感染病科
作者：董靜,女,37 歲,大學(xué)本科,主治醫(yī)師。主要從事各種肝病及生物治療研究。
通訊作者：劉波
duced killer，cik） 治療或聯(lián)合治療等控制肝癌病程[1~5]。我們?cè)谥袊R床實(shí)驗(yàn)注冊(cè)中心注冊(cè)了一項(xiàng)tace 聯(lián)合 cik 細(xì)胞治療肝癌的臨床研究（chic- tr- onc- 12002101），現(xiàn)將臨床療效報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1 研究對(duì)象 我院 2012 年 1 月～2013 年 12 月
診治的晚期肝癌患者 60 例，女性 8 例，男性 52 例； 年齡 32～68 歲（52.2±15.1 歲）。符合衛(wèi)生部 2011
年頒發(fā)的《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。肝功能 child- pugh 評(píng)分 a 級(jí)或 b 級(jí)，無腹水，無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，無門脈癌栓，預(yù)計(jì)生存時(shí)間≥6 個(gè)月，無外科手術(shù)切除指征或患者拒絕手術(shù)。排除存在嚴(yán)重感染、患有嚴(yán)重心、肺、腎、造血及代謝系統(tǒng)疾病、入院時(shí)即伴有循環(huán)功能衰竭、肝內(nèi)巨塊狀、彌漫型肝癌， 排除存在對(duì)化療藥物和 tace 治療禁忌證或?qū)ι镏破愤^敏者。30 例患者接受 tace 聯(lián)合 cik 治療，另 30 例僅接受 tace 治療。治療前，兩組患者年齡、性別、腫瘤數(shù)目、直徑、血管侵犯等基礎(chǔ)資料差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者簽署知情同意書。
1.2藥物、儀器與試劑 il- 1、il- 4 （peprotech 公司）；1640 *培養(yǎng)基（hyclone 公司）、胎牛血清（杭州四季青）；mtt （gibco 公司）；淋巴細(xì)胞分離液
（天津?yàn)笊锟萍加邢薰荆豢?cd3- fitc／抗cd56- pe 及同亞型對(duì)照抗體（美國貝克曼公司）；流式細(xì)胞儀和相應(yīng)軟件購自貝克曼公司。
1.3cik 細(xì)胞的分離、純化和培養(yǎng) 取患者自體外周血或臍血行 cik 培養(yǎng)。臍血采自我院婦產(chǎn)科健康剖宮產(chǎn)足月胎兒，經(jīng)家屬同意簽署捐獻(xiàn)同意書。送我院細(xì)胞中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng)，采用 ficoll 兩步分離法分離出臍血單個(gè)核細(xì)胞，用含血清培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞數(shù)為 1～5×106/ml，在 37℃、5%co2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，于培養(yǎng)的第 1 d 加入終濃度為 1000u/ml 的ifn- γ（上海滬鼎生物科技有限公司）；第 2 d 加入終濃度為 100 ng/ml 抗 cd3 單克隆抗體【妙通（上海）生物科技有限公司】、1000 u/ ml 的 il- 2（上海常斤生物科技有限公司），而后每隔 1～2 d 加入新鮮的含 1000u/ml 的 il- 2 *培養(yǎng)液，并調(diào)整細(xì)胞數(shù)為 1～5×106/ml，繼續(xù)培養(yǎng)、傳代，定期補(bǔ)充抗cd3 和il- 2。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞 cd 抗原的表達(dá)情況。同時(shí)取培養(yǎng)上清行乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、hiv 和梅毒感染標(biāo)志物檢測(cè)，行細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)，檢測(cè)抗支原體 - igg 和內(nèi)毒素水平。
tace 術(shù) 采用改良的 seldinger 技術(shù)在局部麻醉下經(jīng)皮行右側(cè)股動(dòng)脈穿刺插管，在數(shù)字減影血管造影（digital subtraction angiography，dsa）引導(dǎo)下，至腹腔動(dòng)脈主干，再進(jìn)入至肝固有動(dòng)脈或其動(dòng)脈分支，行肝動(dòng)脈造影。明確靶血管后，將微導(dǎo)管超選擇插入腫瘤的血液供應(yīng)動(dòng)脈，注入順鉑（ddp）30～60 mg、5- 氟尿嘧啶（5- fu）75